CRISPR:瞄準改寫單一序列
讓 Cas9 沿著 DNA 雙股螺旋掃描,觀察嚮導 RNA 憑鹼基互補鎖定目標,確認 PAM 是否存在,切開雙股,並看看錯配如何關閉專一性。
由英文原文機器翻譯而成。 開啟英文原文
有待改寫的一句話
兩條扭轉的緞帶是DNA,每一個橫檔都是一對鹼基對(A-T、G-C)。在這串漫長的字母序列中,有一處是有待改寫的目標。發出綠光的12個鹼基就是這個目標(原型間隔序列,protospacer),緊鄰其旁、呈橙色的3個鹼基則是稱為PAM的標記。整個基因體共有三十億個字母,你要如何在其中,只瞄準這一句話呢?
在雙股螺旋中,確認綠色目標與橙色PAM的位置。
gRNA·5′-AUGCAGUCAUGC-3′→不剪切
Targeting
嚮導RNA配對率17%
剪切閾值80%
PAM (NGG)無
