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CRISPR: apuntando a reescribir una sola línea

Escanea Cas9 a lo largo de una doble hélice de ADN, observa cómo un ARN guía se fija en su objetivo por complementariedad de bases, comprueba el PAM, corta la doble cadena, y observa cómo los emparejamientos erróneos desactivan la especificidad.

Traducido automáticamente del original en inglés. Abrir original en inglés

Prologue · 1/5

La única frase que hay que reescribir

Las dos cintas entrelazadas son el DNA, y cada peldaño es un par de bases (A-T, G-C). En algún lugar de esta larga cadena de letras está el único punto por reescribir: el objetivo. Las 12 bases que brillan en verde son ese objetivo (el protoespaciador), y las 3 bases naranjas justo al lado son una marca llamada PAM. El genoma tiene tres mil millones de letras. ¿Cómo apuntas a una sola frase entre todas ellas?

En la doble hélice, confirma las posiciones del objetivo verde y del PAM naranja.

gRNA·5′-AUGCAGUCAUGC-3′Sin corte

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TargetingSin PAM
Tasa de coincidencia de la guía17%
Umbral de corte80%
PAM (NGG)no
CRISPR: apuntando a reescribir una sola línea - Luneidea